Question

怎么培育转基因烟草？

Answer 1

烟草转基因准备工具：EP管灭菌无菌水Ms培养基75%的酒精（蓝口小瓶）升汞(要回收)1ml枪枪头EP管架计时器

1、无菌条件下，将烟草种子放入EP管中用无菌水冲洗2-3次；

2、于75%的酒精中浸泡30-60sec；

3、再用0.1%的升汞处理5min，最后用无菌水冲洗5次；

4、种于MS培养基上，培养在杭州师范大学生命与环境科学院植物学重点实验室组织培养室中，暗培养4天。光照培养20-30天。MS培养基pH。

5、待烟草苗长至3-5cm时（20-30天），取顶芽放于MS+BA0.2mg/L（壮芽，使其快速成长）培养基上，继代培养。

6、继代培养14天后（有小叶片即可），取叶片，大小1cmX1cm，去叶柄，边缘划伤，MS+BA1.0mg/LpH6.0-6.5的预培养培养基上，正面朝下紧贴培养基放置，于黑暗预培养2-3天。

7、然后取出预培养的叶片或茎段，放入侵染液中进行侵染侵染前一天晚上，摇菌农杆菌2瓶。将ml离心管装满菌液，4000rpm离心5min，用悬菌液清洗两次。以1:10比例（10ml悬菌液放1管1.5ml菌体）放入悬菌液，加入As25mg/L（40ml中加40ulAs）不断摇晃侵染液，使其与叶片及茎段切口处充分接触，10min后，取出，放于灭过菌的干燥滤纸上吸干菌液；

8、将叶片及茎段放回到预培养基上，黑暗条件下共培养2-3天，至叶片切口周围有菌；

9、取出共培养的烟草叶片及茎段，用添加500mg/LCef的无菌水冲洗5次，次放置于摇床摇30min，以洗去外植体表面的农杆菌；

10、取出后，用滤纸吸干，转移到烟草诱芽培养基上，诱芽培养基为MS+BA1.0mg/L+Hygmg/L+Cef500mg/LpH5.8；过2周观察，如果发现不长菌，则降低Cef浓度。如果长菌，则继续保持Cef浓度。

11、每两周更换一次培养基，直至长出不定芽，一般情况为2周。

转基因烟草就是利用转基因技术应用到烟草植物的种植中。把吞噬毒素的生物基因嫁接到了烟草植物身上。最新研究表明，转基因烟草具有清理汞污染严重的土壤，吸收军事TNT污染的功能方面与清除RDX（旋风炸药）以及获取了防艾滋病病毒抗体2G12的功能。因此具有重要的价值。

转基因烟草，商业上有三种主要的转基因烟草种植：一是中国式的农艺：防病毒和抗虫性。其次是，维克托烟草在美国和其他国家生产的转基因烟草，具有低尼古丁的特点，再次就是用于提炼药物和烟草的替代产品。

转基因烟草的种植和使用类型决定了所面临的风险因素是不同的。在许多国家里，如保加利亚、加拿大、法国和印度，烟草仍是用做转基因研究的。