植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量
第一种方法是测量260/280的比例，判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收，A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚，高于此值表明有RNA的残留。
第二种方法是凝胶电泳分析，看有无断裂降解。
影响DNA提取质量的因素：
如果实验开始植物样品不经液氮处理，则提取液中的CTAB浓度需要提高到4%。
在大多数情况下，使用0.1%巯基乙醇，并不能完全抑制叶片中的氧化作用。但这种氧化作用不会影响限制性内切酶的活性。如果使用的巯基乙醇浓度高于0.1%，则会大大降低DNA提取的得率。
扩展资料：
DNA的提取方法：
一、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb
二、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。
三、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。
四、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）
五、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
七、碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。
参考资料来源：百度百科-DNA提取
中科雷鸣
2024-11-08 广告
一是测260/280的比例，判断是否有蛋白质的污染。
二是跑胶，看有无断裂降解。
如果植物样品不经液氮处理，提取液中的CTAB 浓度需要提高到4%（W/V）。在许多情况下，使用0.1%（V/V）巯基乙醇，并不能完全抑制叶片中的氧化作用，但是，这种氧化作用不会影响限制性内切酶的活性。如果使用的巯基乙醇浓度高于0.1%（V/V），则会大大降低DNA 的得率。
扩展资料：
在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法，获得可用的DNA大分子。尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用，此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时，考虑除去多糖和酚类物质。
DNA不溶于0.14mol/L 的NaCl溶液中，而RNA则能溶于0.14mol/L 的NaCl溶液之中，利用这一性质就可以将二者从破碎细胞浆液中分开。备过程中，细胞破碎的同时就有Dnase释放到提取液中，使DNA因被降解而影响得率；
参考资料来源：百度百科-dna提取
