
利用大肠杆菌发酵生产人胰岛素的原理
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肠杆菌是原核生物,只有核糖体,只能形成多肽(肽链)。而胰岛素是蛋白质,它的合成是需要内质网和高尔基体的加工。所以,利用大肠杆菌等微生物表达生产胰岛素的过程中,表达产物常常形成包涵体,而不是分泌出来。要通过变性和复性过程才能得到有活性的人胰岛素。
通过基因工程,将人胰岛素基因a、b链的人工合成基因分别组合到大肠杆菌的不同质粒上,然后再移至菌体内,这种重组质粒在大肠杆菌细胞内进行正常的复制和表达,从而使带有a、b链基因的工程菌株分别产生人胰岛素a、b链,然后再用人工的方法,在体外通过二硫键使这2条链连接成有活性的人胰岛素。现在大都已经改为用酵母菌、昆虫培养细胞、或哺乳动物培养细胞等真核细胞作为表达载体,可以直接分泌胰岛素,而少用大肠杆菌。
通过基因工程,将人胰岛素基因a、b链的人工合成基因分别组合到大肠杆菌的不同质粒上,然后再移至菌体内,这种重组质粒在大肠杆菌细胞内进行正常的复制和表达,从而使带有a、b链基因的工程菌株分别产生人胰岛素a、b链,然后再用人工的方法,在体外通过二硫键使这2条链连接成有活性的人胰岛素。现在大都已经改为用酵母菌、昆虫培养细胞、或哺乳动物培养细胞等真核细胞作为表达载体,可以直接分泌胰岛素,而少用大肠杆菌。

2024-09-23 广告
作为凯百斯纳米技术(上海)有限公司的工作人员,我们深知大肠杆菌细胞破碎的重要性。常用的方法包括物理法如超声波破碎、高压破碎,以及化学法如使用表面活性剂破坏脂膜结构。此外,酶处理法也是一种有效手段,通过特定酶如裂解酶来消化细胞壁。选择破碎方法...
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