Question

使用血球计数板对酵母菌进行计数”实验中，为什么先在计数室上盖上盖玻片，再滴加菌液？

Answer 1

原因是盖好盖玻片再滴菌液的话，不怎么容易产生气泡，而且由于菌液滴在载玻片边上会自动渗入计数室的缘故。在菌悬液摇匀后，应先在血球计数板上盖上血盖片，再用滴管吸取少许菌悬液，从计数区中间平台沿血盖片的上边缘滴入一小滴菌悬液，利用液体的表面张力一次性充满计数区。

若先加菌液再覆盖血盖片，则容易因为菌液加入过多，而导致血盖片未与血球计数板支持柱接触，血盖片浮于菌液上方而导致最后计数偏大，同时会因为有气泡产生而导致计数偏小。

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但若菌悬液中不加可以区分细胞死活的试剂时，计数通常计得的是活菌体和死菌体的总和（有时还有微小杂物），还有微小杂物也被计算在内，这样得出结果往往偏高，因此此法适用于体积较大的单细胞微生物的计数。

因前一次清洗不到位，或者保存过程中存在污染，更或者因操作不当导致的计数室存在划痕，若不及时清洗或更换，则会对后期实验计数产生极大影响。所以，在每次使用血球计数板之前都需要加一步镜检计数室，如若在镜检时发现计数室有污物，则需按要求清洗并吹干后再进行实验 。