Question

将目的基因导入动物细胞 (1)方法: 注射技术。 (2)操作程序:目的基因表达载体

如图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序．根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整． （1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到___两种工具酶．如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与___的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是___． （2）获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用___刺激供体雌性鼠超数排卵．雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出． （3）将目的基因导入细胞：通常采用___技术将目的基因导入受精卵． （4）早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及___等物质．当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植． （5）胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行___处理．移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查． （6）转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用___作探针，进行DNA分子杂交检测．

Answer 1

（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到限制酶、DNA连接酶两种工具酶．如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起．标记基因具有鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来．
（2）为了获得足够数量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供体雌性鼠超数排卵．雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出．
（3）通常采用显微注射技术将目的基因导入受精卵．
（4）早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质．当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植．
（5）在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行发情处理．移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查．
（6）经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用发射性同位素标记目的基因制作探针，进行DNA分子杂交检测．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶 乳腺蛋白基因 鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来
（2）促性腺激素
（3）显微注射
（4）动物血清
（5）同期发情
（6）放射性同位素等标记目的基因