Question

tlc薄层色谱原理

Answer 1

第一节 基本原理

薄层色谱法是色谱法中应用最广泛的方法之一，是将细粉状的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料板或铝箔上，形成一均匀薄层，经点样、展开与显色后，与适宜的对照物质在同一薄层板上所得的色谱斑点做比较，用于进行定性鉴别或含量测定的方法。

它具有以下特点：

①分离能力强，斑点集中；

②灵敏度高，数微克甚至数十纳克的物质也能检出；

③展开时间短，一般只需十至数十分钟，一次可以同时展开多个试样；

④试样预处理简单，对被分离物质性质没有限制；

⑤上样量比较大 ，可点成条状；

⑥所用仪器简单，操作方便等。

虽然薄层色谱法从仪器自动化程度、分辨率、重现性方面不如气相色谱法和高效液相法，但由于薄层色谱法具有上述特点，特别是仪器简单，操作方便，用途广泛，因此在实际工作中仍是一种极有用的分离分析技术，已广泛应用于医药学各研究领域中，也适用于工厂、药房等基层实验室。

按分离效能，薄层色谱法可分为经典薄层色谱法和高效薄层色谱法；

按分离机制，薄层色谱法可分为吸附、分配、分子排阻色谱法和胶束薄层法。

薄层色谱法一般用于定性分析，也能用于定量分析和样品的制备。

一、分离原理

在吸附薄层色谱法中，固定相主要是吸附剂，如硅胶、氧化铝等。其色谱过程是将混合组分的试样点在薄层板的一端，将薄板竖直放入一个盛有少量展开剂的封闭容器中。展开剂接触到吸附剂涂层，流动相借助毛细作用不断向上移动，使得组分与流动相和固定相的吸附平衡被破坏，即吸附的组分不断地被流动相解吸下来，解吸下来的组分立即溶解于流动相中并随之向上移动，当遇到新的固定相表面时，又与流动相展开吸附竞争并再次建立瞬间平衡。由于吸附剂对各组分具有不同的吸附能力，展开剂对各组分的溶解、解吸能力也不相同。因此在不断展开的过程中，各组分在两相吸附-解吸过程中行进速度不同，而最终被分离开来。吸附色谱对影响吸附能的构型差别很敏感，因此很适合用于异构体的分离。