Question

基因工程的运载体

基因工程的过程中有一步就是用限制酶切割运载体，然后再用相同的限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端，但是我们老师说限制酶是具有专一性的，既然运载体可以被这种限制酶切割，就说明在运载体中已经含有目的基因了撒，要是载体不包含目的基因那限制酶怎么可以切断呢，它只能切断一种碱基序列哒，那为什么还要从另一个DNA分子中去获得目的基因呢！有人告诉我载体上没有目的基因但是有人工添加的多克隆位点所以可以切断，那是什么，为什么限制酶可以切断。

Answer 1

首先说明运载体中是肯定没有目的基因的。

请注意，限制酶并没有“切断”目的基因，而是“切下”，目的基因必须要完整。

限制酶在切割目的基因时切下的是一段包含目的基因的核苷酸序列。

打个比方，假设有一段序列是1,2,3,4,5，而目的基因是3，那么切的一般就是2,3,4，目的基因两头都会多出一些。

再者，限制酶的转移性针对的是一个核苷酸序列，而不是基因。它所识别的序列，不仅在目的基因旁边有，在运载体上有，甚至可能在人体内也有，因为它只是少数几个核苷酸的固定排序。

希望对你有帮助。

Answer 2

那个限制性内切酶，是切开位点的（也就是它所认识的回旋序列），然后再粘上目的基因，用连接酶连接！载体，应该是起运输的作用的

Answer 3

目的基因不能直接到入受体细胞，那样细胞内部的免疫组织会因不能识别这些外来体，而进行吞噬消灭，那样实验结果就会大打折扣，甚至整个细胞会因此而衰亡

Answer 4

第一种说法是对的。