Question

影响高效液相色谱分离度的主要因素

Answer 1

影响液相色谱仪分离度的因素有色谱柱填充性能、流动相和流速等。

1.色谱柱填充性能：

液相色谱柱的分离性能由固定相粒度、柱长和柱压降决定，这三个参数度也决定了样品组分的保留时间。保留时间不仅与色谱过程的热力学因素k有关，还与决定柱效和分离度的柱性能参数及流动相的粘度有关，这些参数都是影响色谱分离过程动力学的重要因素。

2.流动相：

液相色谱中，改变淋洗液组成和极性是改善分离的最直接因素，不可能通过增加柱温来改善传质。因此，液相色谱大多是恒温分析。流动相选择在液相色谱中显得特别重要，流动相可显著改变组分的分离状况。

3.流速：

流速大于0.5cm/s时，H－u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要参数。

液相色谱仪：

液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液－液（LLC）及液－固色谱（LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。

系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内。

由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附－解析的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出。

通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。