PCR纯化,跑胶没有出现条带,是什么原因?解决的方法是?

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窦蕾买娴
2019-05-12 · TA获得超过3.8万个赞
知道小有建树答主
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你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。
如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。
如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回收看不到,那么,
1.
跑胶用的TAE/TBE是不是1X的,你点胶的时候PCR产物里有没有加足够的loading
2.
你的胶里有没有加EB/泡EB(或其他染色剂)
3.
可能是你做的琼脂糖凝胶没有做好
我之前也有回收载体,明明就很明亮,但是东西都在胶孔里面跑不出来T.
T
我觉得这种情况和loading的关系比较大
GRS塑料
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程建设泣画
2020-03-22 · TA获得超过3.7万个赞
知道大有可为答主
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这个有许多原因,跑电泳有对照吗?比如marker.如果没有就是电泳问题,如果有,你看下有没有引物二聚体,如果没有,pcr整体肯定忘加东西了,需重做,如果有,就是你pcr体系本身有问题,需要优化,或是你的引物不好,需重新设计
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