液相色谱中固定相极性小于流动相极性的色谱方法称为
液相色谱中固定相极性小于流动相极性的色谱方法称为反相色谱法。
反相色谱法(英语:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。
将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两相中的分配,从而研究高分产的各种性质,高分子与探针分子的相互作用以及高分子与高分子间的相互作用。
“反相”这个词有着其历史背景。在1970年代,大多数液相色谱是在未修饰的氧化硅或氧化铝上完成的,他们表面的化学性质是亲水性的,对于极性化合物具有更强的亲和力,因此也叫做“正相”(正常)色谱。
若采用烷基链共价键合到支持表面上,则会倒换洗脱顺序。在反相色谱法中,极性化合物先被洗脱出来,而非极性化合物被保持住,因为它们亲和于反相表面。
分离机理:
在反相色谱法中的固定相是被共价结合到硅胶载体上的直链饱和烷烃,其链的长短不同,最长的是十八烷基、这也是使用得最多的固定相、流动相的极性比固定相的极性强。在反相键合相色谱中,极性大的组分先流出、极性小的组分后流出。
一般说来,固定相上的烷基配合基或被分离分子中非极性部分的表面积越大,或者流动相表面张力及介电常数越大,则缔合作用越强,保留值越大。