Question

制备细胞膜

1材料选择？原因是？ 2该细胞放在清水中、0.9%的生理盐水、浓盐水中的现象分别是（ )( )( )[不变、涨破、皱缩]
3 制备红细胞稀释液的方法是？

Answer 1

首先是制备一定量的细胞，细胞的来源可以是培养细胞，也可以是某种组织。培养细胞的收集相对简单一些，直接用胰酶将细胞从培养瓶上消化下来，制成细胞悬浮液。比较易碎的组织细胞的收集如肝、脾等，可采用匀浆的方法，稍加研磨就可制成细胞悬液。有些结缔组织，直接研磨不易分离出细胞，可先用适量的胶原酶处理。
细胞制备出来后，进行匀浆处理。匀浆的方法有多种，如用高速打碎机破碎，低渗，玻璃珠与细胞共振荡，冻融法，超声波打碎等。可根据实验需要和实验室条件来选择。无论选择哪种方法，都要尽可能保持膜的完整性。整个操作过程要避免过于激烈，pH、离子强度和渗透压等条件要适中，一般常用中性和等渗溶液。
匀浆产生的细胞裂解物，可通过一系列差速离心再加上一个梯度离心来分离细胞膜与细胞器，梯度是根据细胞器的大小、密度和沉降特性来设计的。匀浆分步分离的第一步是差速离心，在一系列的离心过程中离心力逐渐加大，并且将细胞器加入到具有密度梯度的介质中离心，常用的分离介质有蔗糖、甘油、葡聚糖等。由于每种细胞器的大小和沉降特性不同，因此可被分离出来。如果只是分离细胞中的某种细胞器，可直接根据那种细胞器所对应的相对离心力，在细胞匀浆后进行离心分离。哺乳动物红细胞的结构比较简单，其细胞膜可用低渗离心的方法分离出来。如果是独特的细胞膜，可根据表面电荷的密度采用电泳的方法分离，也可根据大小采用凝胶过滤的方法分离

Answer 2

1。哺乳动物成熟红细胞；因为哺乳动物红细胞发育到第六阶段成熟后，细胞质中的细胞器（包括细胞核）会消失，以全力运输氧气，这样经涨破分离后得到较纯净的细胞膜，不存在其他膜系统干扰。
2。涨破（外界浓度低于细胞内部，即低渗状态）；不变（等渗。。）；皱缩（高渗）
3。新鲜血液中加入抗凝剂（如柠檬酸钠等），血液分层，最下层为红细胞（中间是血小板及白细胞，上为血浆），分离出红细胞后用适量生理盐水稀释。。。

Answer 3

哺乳动物成熟红细胞。理由是,哺乳动物成熟红细胞结构简单,经过低渗破坏后很容易就能分离细胞膜和细胞内含物,同时取材方便。
涨破（低渗) 不变(等渗） 皱缩（高渗）

取新鲜血液
加入抗凝剂（如肝素，柠檬酸钠）
离心，取最下层的红细胞
用0.9%的生理盐水稀释

Answer 4

1、材料：哺乳动物成熟的红细胞
原因：这种细胞没有细胞核和各种具膜细胞器，避免了细胞膜与之分离的麻烦。
2、涨破、不变、皱缩
3、取红细胞，用生理盐水稀释
（一、配制:碳酸氢钠5克,无水碳酸钠5克,蒸馏水加至sn。毫升,溶解过滤后备用。 二、效果:此稀释液配制容易,久存不变质,红细胞形态完整、清晰、无皱缩、重叠和溶血等现象。）