Question

结构几何组成的常用方法有哪些，其基本原理如何

Answer 1

dna测序技术，即测定dna序列的技术。在分子生物学研究中，dna的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和
maxam和
gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生
a，t，c，g四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测，从而获得dna序列。目前
sanger测序法得到了广泛的应用。
sanger
法测序的原理就是利用一种dna聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dntp)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddntp)。由于ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在g、a、t或c处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dntps和ddntps的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用x-
光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。