为什么真核DNA无法用碱裂解法提取
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中科雷鸣
2024-11-08 广告
2024-11-08 广告
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dna在碱性条件下氢键会断裂,提取质粒的ph值大约是12吧,我也记不清了。在这种情况下氢键理所当然的会断裂,当然磷酸与核糖间的化学键也会断一些。
提取质粒一般用的是大肠肝菌。
大肠肝菌的质粒dna和染色dna都会发生上述情况,但由于质粒是环状结构,虽然dna也会变性断裂氢键,但螺旋结构却基本不会被破坏,也就是两条单链环还是绞在一起。而染色dna的两条链却分开了。然后降低ph,应该是降到5左右,我记不清楚了。质粒的两条链之间的氢键又会复合,而染色dna的两条链却不像质粒那般复合,众多的染色dna会形成网状结构,沉淀下来。从而得到质粒dna。
真核生物的dna为线状的,也会象上面的那样不能得到完整的dna。
提取质粒一般用的是大肠肝菌。
大肠肝菌的质粒dna和染色dna都会发生上述情况,但由于质粒是环状结构,虽然dna也会变性断裂氢键,但螺旋结构却基本不会被破坏,也就是两条单链环还是绞在一起。而染色dna的两条链却分开了。然后降低ph,应该是降到5左右,我记不清楚了。质粒的两条链之间的氢键又会复合,而染色dna的两条链却不像质粒那般复合,众多的染色dna会形成网状结构,沉淀下来。从而得到质粒dna。
真核生物的dna为线状的,也会象上面的那样不能得到完整的dna。
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碱裂解法只能提取质粒,因为质粒是环形双链比较好恢复,而基因组就无法复性了。
基因组dna只能用表面活性剂法。
基因组dna只能用表面活性剂法。
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