pcr的原理是什么?
洁思隆新材料(苏州)有限公司是一家专注于PCR材料再生和科研的公司,为创造更加安全、舒适、纯净,便捷的人类生活提供全新的材料解决方案的新材料企业。推动人类生活环境的持续改善,创造美好生活。
洁思隆新材料(苏州)有限公司座落在有着“上有天堂,下有苏杭”之称的苏州,它也是一座园林城市。一座有底蕴的美丽城市,一家有责任的新兴公司。我们会在这花园的城市里,萃取自己的产品,不忘初心,为青山绿水,贡献自己的一点力量!
洁思隆新材料(苏州)有限公司,已深耕塑料行业多年。近年来随着经济的发展,环境的污染成为社会的主要议题,洁思隆新材料(苏州)有限公司认为一个有社会责任感的公司要为社会碳中和贡献自己一点力量。为此公司决定致力于塑料的循环利用,再生料的溯源,化学品的使用,环境的保护,社会责任的提升,洁塑隆一直在行动。
PCR(聚合酶链式反应)技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。
重复循环变性→退火→延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
扩展资料:
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃。
在Taq DNA聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法,除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。
参考资料:百度百科-聚合酶链式反应
2024-11-04 广告
广告 您可能关注的内容 |