免疫标记技术标记物-2020医疗卫生检验学
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在临床免疫学检验中有很多的检测方式,其中最重要的一大类就是免疫标记技术。免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光法、免疫酶技术和放射免疫技术。 天津卫生人才网 专家带大家一起来学习一下它们的标记物。
荧光免疫技术(FIA)最早发展使用的标记技术,是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应,该技术主要特点是可以进行原位定位分析。
常用荧光素有:
异硫氰酸荧光素(FITC),呈黄绿色荧光;
四乙基罗丹明(RB200),呈明亮橙色荧光;
四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC),呈橙红色荧光;
酶免疫技术(EIA)是以“酶”作为示踪物质,用于标记抗体/抗原。酶标记的抗体/抗原在保留其免疫学活性的同时,又保留了酶对其底物的催化活性。酶标记的抗体/抗原与其相应的抗原/抗体进行特异性反应后,再加入酶的底物,通过酶对底物的显色反应,进行对待测抗原/抗体进行定位、定性或定量分析。
常用标记酶及底物有:
辣根过氧化物酶(HRP最常用),底物为TMB(最常用)、DAB(组化底物)等;
碱性磷酸酶(AP),底物为p-NPP;
β-D-半乳糖苷酶,底物为4-MUG;
放射免疫技术(RIA)是将抗原抗体反应的高特异性与放射性核素信号的高灵敏性相结合而建立的一种超微量分析技术。根据放射性核素标记抗原或抗体的不同分为放射免疫分析(RIA)和免疫放射分析(IRMA)。
目前常用的是γ放射性核素如125I、131I、51Cr,其中125I最常用,用γ计数器测定。β放射性核素和以3H最常用,用液体闪烁计数仪进行测定。
荧光免疫技术(FIA)最早发展使用的标记技术,是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应,该技术主要特点是可以进行原位定位分析。
常用荧光素有:
异硫氰酸荧光素(FITC),呈黄绿色荧光;
四乙基罗丹明(RB200),呈明亮橙色荧光;
四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC),呈橙红色荧光;
酶免疫技术(EIA)是以“酶”作为示踪物质,用于标记抗体/抗原。酶标记的抗体/抗原在保留其免疫学活性的同时,又保留了酶对其底物的催化活性。酶标记的抗体/抗原与其相应的抗原/抗体进行特异性反应后,再加入酶的底物,通过酶对底物的显色反应,进行对待测抗原/抗体进行定位、定性或定量分析。
常用标记酶及底物有:
辣根过氧化物酶(HRP最常用),底物为TMB(最常用)、DAB(组化底物)等;
碱性磷酸酶(AP),底物为p-NPP;
β-D-半乳糖苷酶,底物为4-MUG;
放射免疫技术(RIA)是将抗原抗体反应的高特异性与放射性核素信号的高灵敏性相结合而建立的一种超微量分析技术。根据放射性核素标记抗原或抗体的不同分为放射免疫分析(RIA)和免疫放射分析(IRMA)。
目前常用的是γ放射性核素如125I、131I、51Cr,其中125I最常用,用γ计数器测定。β放射性核素和以3H最常用,用液体闪烁计数仪进行测定。
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