常用的湿热灭菌法包括
湿热灭菌法包括煮沸法、流通蒸汽灭菌法以及高温蒸汽灭菌法等。
1、煮沸法
煮沸法操作是煮沸100℃5分钟,能杀死一般细菌的繁殖体,许多芽胞需经煮潮5至6小时才死亡,水中加入2%碳酸钠可提高其沸点达105℃,既可促进芽胞的杀灭又能防止金属器皿生锈,煮沸法可用于饮水和一般器械的消毒。
2、流通蒸汽灭菌法
利用100℃左右的水蒸汽进行消毒,一般采用流通蒸汽灭菌器,其原理相当于我国的蒸笼,加热15到39分钟可杀死细菌繁殖体,消毒物品的包装不宜过大或过紧以利于蒸汽穿透,利用反复多次的流通蒸汽,以达到灭菌的目的,本法适用于不耐高温的营养物,如血清培养基的灭菌。
3、高压蒸汽灭菌法
压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的,是热力灭菌中使用最普遍效果最可靠的一种方法,其优点是穿透力强灭菌效果可靠,能杀灭所有微生物,目前使用的压力灭菌器可分为两类下排气式压力灭菌器和预真空压力灭菌器,适用于耐高温或耐水物品的灭菌。
湿热灭菌的原理:
使微生物蛋白质及核酸变形:
湿热灭菌的原理是使微生物的蛋白质及核酸变形从而导致其死亡,这种变形首先是分子中的氢键分裂,当氢键断裂时蛋白质及核酸内部结构被破坏,进而丧失了原有功能,蛋白质及核酸的这种变形可以是可逆的,也可以是不可逆的。
高饱和的水蒸气温度:
若氢键破裂的数量未达到微生物死亡的临界值,则其分子很可能恢复到它原有的形式,为有效地使蛋白质变形,采用高压蒸汽灭菌时就需要水蒸气有足够的温度,这对灭菌效果十分重要,高温饱和水蒸气可迅速使蛋白质变形,蛋白质发生变形的过程即微生物死亡的过程。