Question

请问实验室的常用技术PCR,qPCR,rtPCR，western blot 分别是为了什么目的进行的实验？

比如想要检测细胞中一种蛋白有没有表达该进行哪一种实验？

Answer 1

pcr 常用就是扩基因，提完rna后反转啊，那你扩来基因用做什么就需要你来看了。
菌落PCR，也是扩，放大数目，好验证。
qPCR是荧光染料，做定量，一般是看表达，就是基因的表达情况，基因层面
rtPCR是半定量，相对上面的定量来说没有完全量化，相当于是质化，也能看出问题
western 是做蛋白的

追问

western是看蛋白表达，和免疫染色目的差不多是吗？
还有想要检测蛋白-蛋白相互作用，蛋白-DNA相互作用应该做什么？

追答

en

蛋白蛋白一般用：
（1）Y2H（酵母双杂）；
（2）双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation，BiFC)分析技术；
下面这些互作的方法是上课老师总结的别的
（3）Optical（光学的） methods can monitor protein interactions in real time，如FRET，在生命科学领域，FRET技术是检测活体中生物大分子纳米级距离和纳米级距离变化的有力工具，可用于检测某一细胞中两个蛋白质分子是否存在直接的相互作用。；
（4）还有芯片层面的Protein chips/microarrays；
（5）Surface Plasmon Resonance (SPR):基于表面等离子体共振技术；
（6）拉下实验(Pull-down assay) 拉下实验又叫做蛋白质体外结合实验(binding assay in vitro)，是一种在试管中检测蛋白质之间相互作用的方法。In vivo pulldown (TAP, epitope-tagg)
（7)Split Ubiquitin System(SUS) 分裂泛素化酵母双杂交系统