Tris-HCl缓冲液的配制方法?
Tris-HCl缓冲液的配制方法:
使50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml即可配置成功。
三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。
Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。
扩展资料:
由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。
用途:有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。
参考资料:Tris-HCl-百度百科
Tris-HCl缓冲液的配制方法如下:
使用量筒或容量瓶,量取所需的水。根据实验需求,确定所需缓冲液的体积,并将适量的水加入容器中。请确保使用纯净水或经过去离子水处理的水,以避免杂质对实验结果的影响。
将Tris碱加入容器中。按照实验所需的浓度,计算所需的Tris碱的质量或体积,并将其缓慢加入搅拌的水中。请注意,Tris碱的溶解度有限,因此建议在室温下缓慢搅拌并等待其完全溶解。
调节pH值。使用盐酸(HCl)逐滴加入缓冲液中,并同时使用pH计监测溶液的pH值。根据实验要求,将pH值调节到所需的范围内。在调节pH时,应小心操作,以免加入过多的盐酸导致溶液过酸。
搅拌和储存。使用磁力搅拌器或搅拌棒将溶液充分搅拌,确保各组分均匀混合。完成配制后,可以将缓冲液转移到一个适当的容器中,并根据需要进行储存