Question

请求帮忙，有关氨基酸洗脱

请求帮忙：现有一氨基酸混合物，含有ASP(PI 2.77),GLY(PI 5.97),LEU(PI5.89),LYS(PI 9.74)欲将此氨基酸混合物用阳离子交换树脂层析分离，试问：（1）上样时样品溶液ph
应如何选用？（2）洗脱液的ph合离子强度如何改变？（3）四种氨基酸的洗脱顺序如何？为什么？

Answer 1

1 PH=2~3比较好
2 Ph逐渐升高，盐离子强度逐渐增强
3 顺序从先到后：asp gly leu lys

以下是跟你这个题同类的，具体原因写在下面

Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH条件下加到阴离子交换树脂上，用连续递减pH值缓冲溶液洗脱
悬赏分：50 - 解决时间：2010-11-4 17:42
预测这些氨基酸的洗脱顺序 请详细说明下这个洗脱顺序的理由和阴离子交换树脂洗脱的一般规律 谢谢

提问者： sd3318405 - 四级最佳答案洗脱先后顺序：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分组：1 Arg Lys是碱性氨基酸 PH=7 正电荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性为主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由于是交换树脂层析，氨基酸的与树脂的亲和力主要取决于他们之间的亲和力，其次是氨基酸与树脂之间的疏水相互作用。由于缓冲液先是碱性，所以氨基酸与树脂的亲和力为：酸性氨基酸》中性氨基酸>碱性氨基酸（阴离子树脂的疏水基团带正电，负电被交换了），洗脱的顺序就是：碱性 中性 酸性
考虑氨基酸与树脂的疏水作用：Arg的R基团是三个亚甲基+一个亚氨基，Lys是四个亚甲基，很明显，Arg的疏水作用要弱，与树脂吸引力不够强，最先被洗下来。其他的两组楼主自己分析R基团的疏水性

Answer 2

这个应该逐步分离，一次性分离开，比较费劲，可以利用不同的层析材料进行分离，同时，还要考察氨基酸的分子量差异。ph控制还是最主要的。来源：分离材料网