Question

分离分解纤维素的细菌用什么指示剂

Answer 1

在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料，原理是刚果红可与纤维素形成红色复合物。培养几种细菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。
根据试题分析，纤维素分解菌能产生纤维素酶，利用纤维素。培养基要以纤维素为唯一的碳源，并加入刚果红指示剂。由于刚果红可与纤维素形成红色复合物，而不能与纤维二糖等纤维素的分解产物发生反应，故生长有纤维素分解菌的周围会产生透明圈。微生物培养基制作完成后，应该先调整pH，再灭菌，对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法．常用的在固体培养基上的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．尿素分解菌可以用酚红指示剂检测，纤维素分解菌可以用刚果红染色法鉴定．
解答 解：在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到刚果红染色法．因此，培养基中除了必须的营养成分外，还需要添加刚果红．当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物．当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌鉴定大肠杆菌可用伊红美蓝培养基，若要筛选、鉴定纤维素分解菌常用刚果红染色法，若要鉴定尿素分解菌则需要在培养基中加酚红指示剂。
（2）萃取胡萝卜素的装置中，采取水浴加热的原因是直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸，还要在加热瓶口安装冷凝装置的原因是防止加热时有机溶剂挥发。
（3）从生物材料中得到的蛋白质提取液中往往含有一些无机盐类的小分子，可以用透析的方法去除这些小分子，但该方法不能分离不同的蛋白质。
（4）在凝胶色谱法中，所用凝胶的化学本质大多为多糖类化合物构成的，比如葡聚糖或琼脂糖。分离蛋白质时，最先从层析柱中洗脱出来的是相对分子质量较大
的蛋白质分子。
（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能使蛋白质发生完全变性，并掩盖蛋白质原有电荷的差别，使得电泳迁移速率完全取决于分子的大小，且测定的结果是单条肽链的分子量。
（6）某蛋白质分子用凝胶色谱法测得的分子量为800kDa（千道尔顿），但用SDS-聚丙烯酸酸凝胶对该蛋白分子进行电泳时，只在100kDa和300kDa处出现两条带，由于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳会使蛋白质水解成肽链，说明该蛋白质是由2条不同的肽链组成，可能是4（100+100+300+300）或6（100+100+100+100+100+300）条肽链组成的。
故答案为：（1）伊红美蓝 刚果红 酚红
（2）直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸 防止加热时有机溶剂挥发
（3）透析 不能
（4）多糖 葡聚糖或琼脂糖 相对分子质量较大
（5）分子的大小 单条肽链
（6）4或6
解析：
1、鉴别常见微生物的方法：用伊红美蓝培养基鉴别大肠杆菌，用刚果红染色法鉴别分解纤维素的细菌，用酚红指示剂鉴别分解尿素的细菌。
2、萃取法提取胡萝卜素过程中采用水浴加热的原因：有机溶剂用明火直接加热易爆炸。
3、凝胶电泳法：
（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。
（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。
4、凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
点评：
本题主要考查鉴别微生物的方法、从生物组织中提取某些物质、和蛋白质的提取与分离技术的相关内容，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断。