如何设计引物
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引物应当超出限制性内切酶识别位点至少3个核苷酸。
避免二聚体和自身互补：设计引物时需要避免两个引物之间形成二聚体或自身互补，这会影响PCR效率和特异性。进行特异性检测：使用软件工具进行特异性检测，以确保所选引物只扩增目标DNA序列而不扩增其他非特异性DNA。
引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右。Tm值在72℃左右可使复性条件最佳，至少要在55-80℃之间。
引物的长度一般为15-30bp，常用的是18-27bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于TaqDNA聚合酶进行反应。
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上海宇玫博生物科技有限公司
2018-10-30 广告
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