检测酶活性浓度应在酶促反应的哪个时期
检测酶活性浓度应在酶促反应的零级反应期。
酶催化活性浓度测定时的连续监测法反应期,连续监测法是指在适当的仪器上,在不终止酶反应的条件下,多点监测整个酶促反应过程中某一反应引起的产物或底物随时间变化的情况,在反应速度恒定期间即零级反应期,以单位时间酶反应初速度计算酶的活性浓度。
测定酶活性浓度的两大类方法:
1、固定时间法(取样法、终点法、两点法)
先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。
用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。
该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。
2、连续监测法(速率法)
连续监测法具有测定准确等众多的优点,随着科学技术的发展,自动生化仪的使用,正在逐步取代“固定时间法”。实际工作中,测酶活性浓度常用酶偶联法。
扩展资料:
酶催化活性或活性浓度是一个相对的概念,与测定方法及测定条件有关。不同的测定方法,酶活性的结果可以相差数倍,以至各实验室之间的测定结果难以比较,参考值也难以统一,给临床医生带来不少麻烦。
为了更直观地反映酶含量的变化,很多实验室不局限传统的报告方式(U/L),而开始使用正常上限升高倍数这一表示方法作为酶活性浓度的表示法。
所谓ULN是指把酶测定值转换为正常上限值的倍数。简单地说,就是用测得的酶活性结果除以参考范围的上限值。由于酶学测定中,一般以酶增加的异常较多,故不取正常下限值作为倍数指数。
参考资料:百度百科-酶活性单位