过氧化氢酶活性测定
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过氧化氢酶活性测定(Determination of catalaseactivity),是根据过氧化氢酶(PHD)能催化过氧化氢生成氧的特性,常用碘量法和电极法。
过氧化氢酶普遍存在于植物组织中,其活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力均有关系,故常加以测定。通过实验可了解过氧化氢酶的作用,并掌握测定过氧化氢酶活性的原理和方法。
前者通过测定PHD催化H2O2反应后剩余的H2O2与碘化物作用生成碘量的变化计算PHD活性。该法设备简易,但操作复杂,误差较大。
后者的原理是H2O2为有电活性物质,但经PHD催化后其产物为无电活性物质,用铂电极来测量PHD催化前后电流变化引起电压的变化,测出PHD活性大小。还可应用分光光度法、瓦氏呼吸仪检压法、硫酸高铈法等。
任何重金属离子(如硫酸铜中的铜离子)可以作为过氧化氢酶的非竞争性抑制剂。另外,剧毒性的氰化物是过氧化氢酶的竞争性抑制剂,可以紧密地结合到酶中的血红素上,阻止酶的催化反应。
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