Question

求叶绿素的提取具体操作步骤

Answer 1

提取：（1） 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片（2g左右），洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研。（2） 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2-3ml 95％乙醇，研磨至糊状，再加10-15ml 95％乙醇，离心35min，提取上清液过滤于三角瓶中，残渣用10ml 95％乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。（3） 如无新鲜叶片，也可用事先制好的叶干粉提取。取新鲜叶片（以菠菜叶最好），先用105℃杀青，再在80℃下烘干，研成粉末，密闭储存。用时称叶粉2g放入小烧杯中，加95％乙醇20-30ml 浸提，并随时搅动。待乙醇呈深绿色时，滤出浸提液备用。分离：（1） 取圆形定性滤纸一张（直径11cm），将其剪成滤纸条（9cm×3cm），用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液，沿纸条的长度方向涂在纸条的一边（距边约1cm），使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内，风干后，再重复操作数次。（2） 在层析缸中加入适量的推动剂，将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中，使滤纸条下端浸入推动剂中。迅速盖好层析缸盖。此时，推动剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散，并把叶绿体色素向上推动，不久即可看到各种色素的条带。（3） 当推动剂前沿接近滤纸边缘时，取出滤纸，风干，即可看到分离的各种色素：叶绿素a为蓝绿色，叶绿素b为黄绿色，叶黄素为鲜黄色，胡萝卜素为橙黄色。用铅笔标出各种色素的位置和名称。

Answer 2

叶绿素的提取
▲ 将新鲜菠菜（Spinacia）叶片洗净擦干，去叶柄及叶脉。称取样品 8g，剪碎置研钵内，加入 8cm3丙酮及少许固体碳酸钠，迅速研磨成匀浆；然后再加入 20cm3丙酮充分研磨。
▲ 在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉，将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中，再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵，合并滤液。
▲ 沿分液漏斗的壁小心加入 40cm3蒸镏水，轻轻摇动，使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟，待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层。如发生乳化现象可加入 2－3cm3饱和NaCl 溶液。
▲ 在分液漏中再加入 40cm3蒸镏水，轻轻摇动，以洗去石油醚中残留的丙酮，共洗两次。然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中，置暗处或用黑纸包好备用。