Question

回答下列有关遗传信息传递表达和基因工程的问题．?表中列出了几种限制酶识别序列及其切割点，图1、图2中

回答下列有关遗传信息传递表达和基因工程的问题．?表中列出了几种限制酶识别序列及其切割点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．（1）限制酶Sma I和限制酶Xma I作用的相同点是______；不同点是______．（2）研究发现复制原点的碱基序列特点通常含A、T碱基较多，其意义是______．（3）在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，在质粒上构建新的限制酶切位点．首先用______酶处理质粒；然后用DNA聚合酶等处理质粒；再运用______酶处理质粒，从而形成新的限制酶切位点，即可被______酶识别．?基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤．图3表示运用影印培养法（使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入大肠杆菌．（4）培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______、______．从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______菌落中的细菌．

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Answer 1

（1）限制酶Sma I的识别序列是CCCGGG，在C和G之间切割；限制酶Xma I的识别序列是CCCGGG，在第一个C和第二个C之间切割．由此可见，这两种酶的识别的序列相同，但切割位点不同．
（2）因为CG碱基对间有三个氢键，而AT碱基对间有两个氢键，可见AT碱基对间氢键数少，这使DNA双链解旋更容易，所以复制原点的碱基序列特点通常含A、T碱基较多．
（3）图中质粒只有EcoR I酶和Pst I酶的识别位点，而切割目的基因需要Mse I酶和Pst I酶，所以需要对质粒进行改造，在质粒上构建新的限制酶切位点，即Mse I酶切位点．首先用EcoR I酶处理质粒；然后用DNA聚合酶等处理质粒；再运用DNA连接酶处理质粒，从而形成新的限制酶切位点，即可被Mse I酶识别．
（4）由图可知，质粒上含有两个抗性基因，即四环素抗性基因和青霉素抗性基因．对质粒进行改造时，已将青霉素抗性基因破坏，所以含重组质粒的大肠杆菌能在含有四环素的培养基上生存，但在含有青霉素的培养基上不能生存．所以图中培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有四环素和青霉素，在含有四环素的培养基上能生存，在含有青霉素的培养基上不能生存的4和6菌落就是含有目的基因的菌落．
故答案：（1）识别的序列相同      催化反应的结果却不同（切割位点不同）
（2）AT碱基对间氢键数少，使DNA双链解旋更容易
（3）EcoRI      DNA连接       MseI
（4）四环素      青霉素（青霉素和四环素）     4和6