花卉类病毒的生物学是怎样检测的?
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2019-07-09 · 农业农村部直属的大型综合出版社
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生物学检测:利用类病毒的特异鉴别寄主来诊断和检测。如菊花矮化类病毒(CSVd),可以从待检样品中抽提低分子RNA,接种到特定的指不植物,如菊花Mistletm品种、爪哇三七(Gynura:auanyiana)、番茄(Lycopersicon:esculentum)。
接种缓冲液的组成是100mmolTris,10mmolEDTA,pH7.5。接种时用沾有接种原的刹须刀在菊花和爪哇三七的茎部轻轻切割5~10刀,再用棉棒涂抹。番茄可以用4~5叶期的幼苗直接用涂抹法接种。被接种植物放在30℃左右的温室培育,观察症状。接种36d后,菊花上出现黄色斑点,顶叶较少,从上数第3~5叶上症状更明显。
接种45d后,爪哇三七出现顶叶卷曲症状。但没有柑橘裂皮病类病毒接种时症状明显。接种60d后,番茄上不表现任何症状。但回接菊花Mistletm品种,证明CSVd在番茄上属于潜伏侵染。
生物检测需要严格的温度条件,如果温度条件控制不严格便难以得到可信的结果。此外,检测批量样品,还需要较大的空间。
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