提取出的DNA怎样放回细胞体内?
好像是不行的,因为提取过DNA的细胞不会再生长 。首先,严格地说,它不是DNA的降解,而是DNA中断后形成的片段,因为通常DNA很长,在操作过程中很容易被外力破坏形成碎片,这是正常现象,这在提取中是无法避免的,只能尽可能减少,如果降解,将形成分散的条带,条带差异不明显, 操作时注意轻柔。
不要用力摇晃和吹,最好使用剪刀提前斜切炮头,以扩大炮头的孔径,减少抽吸时对DNA的剪切力, 注意添加RNA酶降解RNA。DNA提取主要是CTAB法,其他方法包括物理方法,如玻璃珠法,超声波法,研磨法和冻融法。化学方法如异硫氰酸胍法和碱裂解法。生物模式, 酶法,根据核酸分离纯化方法的不同。
有二氧化硅材料,阴离子交换树脂等,通常用已知分子量的标准DNA片段进行电泳,通过比较可以得到DNA标本的大小,如果带尾,则添加的DNA量过大或凝胶准备不充分。如果DNA的分子量很小或一片模糊,则表明DNA降解了。它与整个提取过程有关,如果提取质量良好,则DNA片段完整。
然而,即使你很小心,也会有部分碎片化,通过琼脂糖电泳检测,条带一般大于10KB,可以认为是合格的,满足大多数实验要求。最好储存新鲜组织。如果不能立即提取,应储存在-70℃或液氮液氮冷冻,他有粉碎和研磨,还有组织均化法,还有液氮均化法。
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2024-09-23 广告