未转化的细胞可以是目的基因导入受体细胞后未能稳定存在与表达吗?
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将目的基因导入受体细胞
转化:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
(1)导入植物细胞(体细胞、受精卵)
1. 农杆菌转化法(双子叶植物、裸子植物)
受损,伤口细胞分泌酚类化合物,吸引农杆菌移向,Ti质粒上T-DNA(上插目的基因)转移至受体细胞整合到受体细胞染色体上。
2. 基因枪法(单子叶植物)
3. 花粉管通道法
(2)导入动物细胞(受精卵)显微注射技术
(3)导入微生物细胞
优点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少、对人体无害(大肠杆菌)
步骤:Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。
转化:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
(1)导入植物细胞(体细胞、受精卵)
1. 农杆菌转化法(双子叶植物、裸子植物)
受损,伤口细胞分泌酚类化合物,吸引农杆菌移向,Ti质粒上T-DNA(上插目的基因)转移至受体细胞整合到受体细胞染色体上。
2. 基因枪法(单子叶植物)
3. 花粉管通道法
(2)导入动物细胞(受精卵)显微注射技术
(3)导入微生物细胞
优点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少、对人体无害(大肠杆菌)
步骤:Ca2+处理细胞,使其成为感受态细胞,重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。
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