Question

双抗体夹心法原理

Answer 1

双抗体夹心法原理如下：

原理：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子，但不适用于小分子抗原。将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。

加入待检样品，保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。

双抗体夹心法的优缺点：

优点：高特异性，使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的；适用于复杂样品，抗原不需要进行纯化即可用于检测；灵活性更大，灵敏度更高，可采用直接法也可采用间接法。

缺点：检测物需要拥有两个以上不同的抗原表位或多个相同的重复表位；不适用于检测小分子物质。

双抗体夹心法简介：

双抗体夹心法，是将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里，洗涤一次；加待测抗原，如两者是特异的，则发生结合，再加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体，使一单位的抗原同时结合两单位的抗体形成“夹心”；最后加入该酶的底物，根据产生的有色酶解产物颜色的深浅来判断待测抗原的含量。