Question

动物肝脏中dna的提取

Answer 1

动物肝脏中dna的提取方法如下：

1、利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同将两者分离，常用的方法是用1mol/L氯化钠提取抽提，得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡，使之乳化再离心除去蛋白质，此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中，用2倍体积95%乙醇将DNA钠盐分离出来。

2、也可用0.15MNaC1液反复洗涤细胞破碎液除去RNP，再以1mol/LNaCl提取脱氧核糖蛋白，再按氯仿-异戊醇法除去蛋白。两种方法比较，后种方法使核酸降解可能少一些。以稀盐溶液提取DNA时，加入适量去污剂，如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离。

3、在提取过程中为抑制组织中DNase对DNA的降解作用在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的络合剂。通常用1.5mo1/LNaCl，0.015mol/L柠檬酸钠，并称为SSC溶液，提取DNA。

在浓氯化钠溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。