Question

若实验室想要筛选一株产高温脂肪酶的天然菌株,并获得纯化的酶液,请设计培养若实验室想要筛选一株产高温？

Answer 1

高温脂肪酶是一种适用于高温条件下的脂肪水解酶，寻找产生高温脂肪酶的天然菌株并获得其纯化的酶液可以按照以下步骤进行：

筛选菌株：

• 采集不同环境（例如深海泥沙、火山口温泉、沸腾泉等）的样品来分离微生物。

• 对分离出的微生物进行初步筛选，通过构建含有脂肪为唯一碳源的培养基，观察菌落生长情况，筛选出能够在高温（如60-80 ℃）条件下生长的菌株。

• 在高温条件下对菌株进行脂肪酶活性测定，选择具有较高脂肪酶活性的菌株作为后续研究的对象。

• 对筛选出的菌株进行分离纯化，保持菌株的原始性质。

获得纯化的酶液：

• 从预处理的菌株中获取菌株发酵产生的菌体或细胞外物质，利用离心、过滤等方法去除杂质。

• 获得的发酵产物经过多步柱层析、电泳等手段进行纯化和分离，从中获得高纯度的酶液。

• 对纯化获得的酶液进行酶学性质测定，如最适温度、最适pH、稳定性等。同时进一步确定此酶的结构，如氨基酸序列、分子量等。

通过以上步骤可以筛选出一株产高温脂肪酶的天然菌株，并获得该菌株纯化的酶液。