PCR中引物的作用是什么?

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崔翠玲 2024-06-21
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所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 更专业的解答可联系广州双螺旋基因技术有限公司,产品服务:广州双螺旋基因技术有限公司专注于检测设备及配套试剂的研发、生产及销售,致力于为客户提供分子检测整体服务体系,目前已推出检测仪器与检测试剂等多种产品,涵盖水产养殖病害检测、致病微生物检测、物种鉴定等多个应用领域。谢谢!
海边的鸟儿啊
高粉答主

2023-01-21 · 希望能自由的飞翔
海边的鸟儿啊
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pcr中引物的作用是作为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。

人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。

PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物。设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上的一小段DNA序列相同;3′端引物与位于待扩增片段3′端的一小段DNA序列互补。

扩展资料

引物设计的基本原则:

1、引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。

2、引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C 过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列参照。

3、引物内部不应出现互补序列。

4、两个引物之间不应存在互补序列,尤其是避免3 ′端的互补重叠。

5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70%,引物3′末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列。

参考资料来源:百度百科-PCR

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崔翠玲
2024-06-21 广告
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