基因工程中主要的工具酶有哪几种,它们的作用是什么
基因工程工具酶主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类,具体解释如下:
1、DNA限制性内切酶
生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息;
2、连接酶
它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键;
3、聚合酶
系专司生物催化合成脱氧核糖核酸和核糖核酸的一类酶的统称;
4、核酸酶
核酸酶有DNase、RNase、核酸酶S1等,可水解相应的DNA和RNA,核酸酶S1可降解单链DNA和RNA,用量增大也可降解双链核酸,它可用于切去ds-cDNA合成中产生的发夹环;
5、修饰酶
体内有些酶可在其他酶的作用下,将酶的结构进行共价修饰,使该酶活性发生改变,这种调节称为共价修饰调节。
扩展资料:
工具酶的相关应用——多重放大技术:
为了获得更高的检测灵敏度,将多种信号放大技术结合起来使用是一种有效途径。基于切刻内切酶与DNA聚合酶组合作用的等温循环链置换放大技术,是近年来被广泛使用的一种工具酶组合信号放大技术。
该技术的基本原理是:通过碱基的互补配对杂交形成切刻内切酶的识别位点后,切刻内切酶在该位点对其中的一条核酸链进行切刻作用产生3′端为羟基的切口。
聚合酶识别该切口的3′端,以未切割的序列为模板,沿着3′到5′的方向复制聚合置换被切割链的另一段序列,最后形成一条完整的双链结构。形成的双链DNA再次被切刻内切酶识别剪切,启动聚合酶反应。
参考资料来源:百度百科-工具酶
限制性核酸内切酶用来切割运载体和目的基因两端;而DNA连接酶则是将目的基因与运载体的黏性末端连接在一起。
同裂酶,同尾酶
DNA连接酶
DNA水解酶
Klenow酶
T4―DNA酶
反转录酶
单链核酸外切酶:核酸外切酶七型,
双链核酸外切酶:核算外切酶三型,
单链核酸内切酶:S1核酸酶
单链内切双链外切的核酸酶:Ba131核酸酶
末端脱氧核苷酰转移酶,碱性磷酸单酯酶(实验室常用的大概十几种,工具酶好像有五十来种)