Question

PCR引物是什么？

Answer 1

PCR引物又称为寡核苷酸引物，也就是RNA，是由人工合成的，分为两种，引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制，也就是只能识别3'的尾端。
而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上，所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部（就是末尾是3'端的那一边）结合，为那些脱氧核苷酸提供3'的末端，就相当于开了个头。然后在DNA聚合酶的作用下合成两条新链。而那段引物就成了新链的一部分。

扩展资料：
引物设计：
引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。
在PCR（聚合酶链式反应）技术中，已知一段目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物，利用PCR扩增技术，目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环，延伸后得到的产物同样可以和引物结合。
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功，但遵循某些原则，则有助于引物的设计。
引物设计有
3
条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构，再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配)。
具体实现这
3
条基本原则需要考虑到诸多因素，如引物长度（primer
length），产物长度（product
length），序列
Tm
值
(melting
temperature)，引物与模板形成双链的内部稳定性(internal
stability,
用
∆G
值反映)。
形成引物二聚体(primer
dimer)及发夹结构（duplexformation
and
hairpin）的能值，在错配位点（false
priming
site）的引发效率，引物及产物的GC
含量（composition），等等。必要时还需对引物进行修饰，如增加限制性内切酶位点，引进突变等。
参考资料来源：百度百科－引物
参考资料来源：百度百科－寡核苷酸

Answer 2

pcr技术的原理是利用碱基互补配对的原则，把体内基因的复制在体外进行，从而得到大量的目的基因。主要原理如下：双链dna分子在临近沸点的温度下加热时便会分离成两条单链的dna分子，然后dna聚合酶以单链dna为模板，并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸（dntp）合成新的dna互补链。此外，dna聚合酶同样需要一小段双链dna来启动“引导”新链的合成，因此新合成的dna链的起点事实上是由加入在反应混合物中的一对寡核苷酸引物在模板dna两端的退火位点决定的。在为每一条链均提供一段寡核苷酸引物的情况下，两条单链dna都可以作为合成新生互补链的模板，因为在pcr反应中所选用的一对引物是按照与扩增区段两端序列彼此互补的原则设计的，因此每一条新生链的合成都是从引物的退火结合位点开始，并沿着相反(5’→3’方向)方向延伸。如此变性、复性、延伸三个过程反复循环，产生了目的片断的大量克隆。
pcr技术是模仿体内的条件，使基因扩增，所以在扩增体系中需要有dna聚合酶、一定的ph值的缓冲液、要扩增的目的基因（模板），起始扩增的dna目的片断的引物，及扩增需要的原料（四种三磷酸脱氧核糖核苷酸），mg2+,dna复性、变性及延伸温度与时间等。