Question

关于信号肽的问题。

首先，我有几段基因序列，通过软件分析，已经确认其中没有信号肽序列。为了构建分泌型抗体的载体，我需要在基因前端加上信号肽序列，我想问的是，加什么信号肽序列好一些，是通过什么方法确定一个基因加什么信号肽的，另外，确定了用某个信号肽，我应该去哪里查找对应的基因序列呢。
回答的好的再送200分，谢谢。

Answer 1

首先要确定表达宿主，你的基因要是真核生物的基因，最好还是用酵母做宿主表达目的蛋白。
选择信号肽序列是要看宿主的种类而定，
如果没有信号肽序列，可以考虑利用酵母的某些分泌蛋白或者膜蛋白的信号肽序列作为你的基因的信号肽，如酿酒酵母的转换酶，还有a配对因子（AMF）的信号肽序列。
如果你想用大肠杆菌做宿主，那可以用外膜蛋白，如ompA，但是大肠杆菌的蛋白分泌效率低。
通常要做分泌型蛋白的表达，所购买的相应的载体上已经准备了信号肽序列，如果没有的话，要去NCBI查找相应的基因信号肽序列，自己做重组。