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原因:当改变的DNA和蛋白质加入溶液II,细菌溶解,蛋白质和DNA变性和溶解。这使得整个溶液非常粘稠,拉出了丝。
将溶液添加到基础处理中。NaOH主要用于裂解细胞和释放DNA,因为在强碱性条件下,膜由双层膜结构转变为微胶囊结构。SDS与NaOH配合使用,增强NaOH的强碱性,SDS作为阴离子表面活性剂,破坏脂质双层膜。
这一步的注意事项:
首先,不要太久,因为基因组DNA片段在这样的碱性条件下会慢慢分解。
第二,加入溶液2后,操作一定要轻柔,剧烈混合会导致基因组DNA污染。
扩展资料:
注意事项:
1、 洗脱缓冲液在60℃洗脱时,洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
2、 细菌应该完全悬浮。如果菌体没有完全悬浮,加入溶液II后,剩余菌体将成为难以完全分解的菌体。加入溶液III后,仍有一部分蛋白质残留在溶液中,成为蛋白质残渣的最大来源。
3、测量DNA溶液体积,按lg/ mL准确加入固体CsCl,加热至30℃溶解。轻轻地混合溶液直到盐溶解。
参考资料:百度百科-质粒抽提
参考资料:百度百科-质粒DNA纯化
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