Question

实时荧光定量pcr数据如何统计？

近日做实时荧光定量pcr，得到了不同的ct值，只是计算了△△ct以及2-△△ ct的值，但是我不知道如何使用spss进行统计分析，看到别人的文章都是均数±标准差的形式，我不知道如何这样统计。谢谢大家。
例如我有 3个组，正常组，模型组，药物组，3个基因 tnf nf-kb 以及actin内参，重复3次，这样得到27个ct值，如何统计成x±s的方式呢？以及计算p值等。谢谢。。
（也可以站内联系）

Answer 1

所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行， PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。 更专业的解答可联系广州双螺旋基因技术有限公司，产品服务：广州双螺旋基因技术有限公司专注于检测设备及配套试剂的研发、生产及销售，致力于为客户提供分子检测整体服务体系，目前已推出检测仪器与检测试剂等多种产品，涵盖水产养殖病害检测、致病微生物检测、物种鉴定等多个应用领域。谢谢！

Answer 2

首先你这样做出来的统计没有意义。
应该是至少3次独立实验，而不是重复3次PCR。
如果3次试验，每次重复3次（取平均值算一次）。然后先定各个基因在对照组的值为一，再算出其他组该基因的相对量，比如内参CT值一样（都是15），而TNF的CT值对照组是20，而模型组是19，则相对量是2 （对照组为1）。△△ct=（19-15）-（20-15）= -1， 2-△△ ct= 2。
以此类推。
其实你只有3组，2个基因。用ANOVA先算，然后再用t test就可以了。结果表达为TNF：对照组1， 模型组想x± d, 药物组y± d. NF-kB: 对照组1， 模型组想x± d, 药物组y± d. TNF和NF-kB间不需要比较。

请参考我发表的文章：
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1021/bp060102e/abstract
如果你提供email, 我可以发全文给你。

Answer 3

一般跑实时定量的机器的电脑上有软件自己可以分析的 可以抄写出数据来自己上EXCEL表格做出柱状图 也可以直接将软件给的数据图下载下来