未知的菌落如何鉴定到种和属
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首先确定种
1.选择性培养基来做一个种大概的判定(比如SS--志贺沙门,Ecca---大肠,He---好多菌都可以,碱胨水---霍乱......),根据菌落形态大小和生长情况来做初步判定,其实这个步骤也是为了纯化菌,但对菌的方向大概有了一个确定,对下步生化反应的选择也有帮助;
2.对平板上的可以菌落做生活反应,来做进一步核实,比如说,KIA双糖,氧化酶反应,v-p动力试验......;
3.如果以上符合该菌生化特性,你就可以做血清鉴定了,可以鉴定属
确定属
4.这时候可以用血清鉴定其血清分型,即属。
这个一般的微生物实验室都是有条件的
上面的2.3.4步也可用生化板条来做如API20,这个就会贵一点,但会快很多
如果有条件,有生物酶标仪,军科院的新产品,可以直接做出来菌的种,有点贵.
当然PCR还是最快捷的方法,但因为是未知菌,没有范围,也很麻烦的,引物就得准备好多.
楼上说的涂片现在用的少了,麻烦死了,除非你经验多,一下就瞧得出来,不然只能看出是球菌,弧菌,杆菌,没啥意义.
但如果你检测目标均,就可以查看国标了,差不多就是1.2.3.4几个步骤.
1.选择性培养基来做一个种大概的判定(比如SS--志贺沙门,Ecca---大肠,He---好多菌都可以,碱胨水---霍乱......),根据菌落形态大小和生长情况来做初步判定,其实这个步骤也是为了纯化菌,但对菌的方向大概有了一个确定,对下步生化反应的选择也有帮助;
2.对平板上的可以菌落做生活反应,来做进一步核实,比如说,KIA双糖,氧化酶反应,v-p动力试验......;
3.如果以上符合该菌生化特性,你就可以做血清鉴定了,可以鉴定属
确定属
4.这时候可以用血清鉴定其血清分型,即属。
这个一般的微生物实验室都是有条件的
上面的2.3.4步也可用生化板条来做如API20,这个就会贵一点,但会快很多
如果有条件,有生物酶标仪,军科院的新产品,可以直接做出来菌的种,有点贵.
当然PCR还是最快捷的方法,但因为是未知菌,没有范围,也很麻烦的,引物就得准备好多.
楼上说的涂片现在用的少了,麻烦死了,除非你经验多,一下就瞧得出来,不然只能看出是球菌,弧菌,杆菌,没啥意义.
但如果你检测目标均,就可以查看国标了,差不多就是1.2.3.4几个步骤.
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首先必须确定是纯菌落,宏观上看菌落形态,边缘有无缺刻,是凸起还是平的,正反面颜色,然后是染色镜检.真菌看菌丝有没有隔,孢子梗,假根,孢子穗等等形状。细菌染色一般是先进行革兰氏染色,看看是杆菌还是球菌或者弧菌。这些工作做完以后,再进行生理生化试验,这样做下来基本上可以鉴定到属。要鉴定到种就必须拿去测序了,细菌测16sRNA,真菌测18 SRNA,有条件的实验室可以自己测,没有条件的可以送到专门机构去测,一般不贵,十几块钱一个碱基。
希望能够对你有所帮助。
同意网友“第三人”的看法,我的方法比较传统经典。你的方法比较快速高效。
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