3,5-二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的?
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可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计。
在540nm 波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
扩展资料:
注意事项:
比色仪器分光光度计应定期检定,应选择正确的波长,合适光程的比色皿。色皿应保持干净,受污染的比色皿可用稀硝酸浸洗,用镜头纸擦拭表面,比色皿内液体不能有气泡或悬浮物。通常情况下,比色测定在室温进行。
显色温度与时间。显色反应有一定的温度和时间要求,如高碘酸钾氧化比色法分析MnO,应微沸10~15min使显色完全,并冷却至室温下比色。二安替比林甲烷比色法分析TiO。,由于显色反应较慢,显色时间则需较长时间(40min以上)。
参考资料来源:百度百科-dns
参考资料来源:百度百科-比色法
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通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度,绘制标准曲线,查对标准曲线并计算,便可求得样品中还原糖的含量。
3,5-二硝基水杨酸,3,5-Dinitrosalicylic acid ,简称DNS。在碱性条件下,还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热,3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系,在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值,查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。
3,5-二硝基水杨酸,3,5-Dinitrosalicylic acid ,简称DNS。在碱性条件下,还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热,3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系,在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值,查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。
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通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度,绘制标准曲线,查对标准曲线并计算,便可求得样品中还原糖的含量。总糖包含:葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖
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通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度,绘制标准曲线,查对标准曲线并计算,便可求得样品中还原糖的含量。
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