Question

简介免疫分析技术

Answer 1

免疫技术为20世纪90年代优先研究、开发和利用的农药残留分析技术，世界粮农组织(FAO)已向许多国家推荐此项技术。免疫分析法(immunoassay，IA)是将免疫反应与现代测试手段相结合而建立的超微量测定技术。免疫分析法是生物酶技术、荧光光谱技术、辐射技术、免疫分析技术应用于农药残留分析领域的一门新技术，是基于抗原和抗体之间的特异性识别和结合反应为基础的一种微量分析方法。免疫是机体识别和排除进人体内的抗原性异物的保护性应答反应。较大分子的农药可以直接作为抗原进入脊椎动物的体内产生免疫应答，从而得到可以和该农药分子特异性结合的抗体；小分子量的农药(相对分子质量<2500)一般不具备免疫原性，不能刺激动物产生免疫反应，但有与相应抗体在体外发生吸附反应的能力，即有反应原性，这类小分子物质在免疫学上称为半抗原。农药是半抗原，一般不具备抗原性，不能刺激动物产生免疫反应，需要首先将该小分子通过与一定碳链长度、大分子的载体蛋白质(通常使用牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、卵清蛋白)以共价键偶联制备成人工抗原，使动物产生免疫反应，产生识别该农药并与之特异性结合的抗体。以共价键偶联成人工抗原使动物产生免疫反应从而产生识别该农药并与之相结合的抗体(多克隆抗体)，通过对半抗原或抗体进行标记(酶、荧光物质、放射性同位素等)，利用标记物的生物、物理、化学放大作用，对样品中的特定的农药残留进行定性或定量检测。通过对半抗原或抗体进行标记(放射性核素、酶、荧光素标记等)，利用标记物的生物或物理或化学放大作用来进行工作，它集测定的高灵敏性和抗体反应的强特异性于一体。它的开发过程需要投入较多资金和较长时间，但具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点。目前多用于单一农药残留检测，不适合应用于多残留检测。1971年Ercegovich[坞。]最先讨论了农药DDT、马拉硫磷及氨三唑(amino—triazole)的免疫测定。随后，大量研究免疫分析法在农药残留中的应用。Kun等报道了利用免疫分析测定对硫磷杀虫剂农药残留，最低检测限达到26ng／mL，相对标准偏差小于10
9／6。Laura等[坞0]报道利用化学发光免疫分析(cL—IA)测定农药残留。Anne等报道用非同位素免疫分析法(cMIA)测定氯麦隆杀虫剂，采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)作为检测器，极大提高灵敏度。农药残留的免疫学技术检测食品的范围很广，包括水果、蔬菜、饮料、啤酒、葡萄酒、乳、肉、动植物油、蜂蜜、豆类、谷物等。一些商品化的试剂盒也相继开发出来。国家农业部环保所李治祥和黄土忠于1990年研制了农药残毒速测箱，其原理就是有机磷和氨基甲酸酯类农药对动物和昆虫的致毒作用是通过特异性抑制胆碱酯酶(chE)来实现的。将chE与样品提取液反应，若chE受到抑制，表明样品提取液中含有OPS和氨基甲酸酯类农药，这时基质不能水解，就不能变色；否则ChE不受到抑制，基质水解产生蓝色。另外，国外还推出了多种酶标试剂盒应用于常规分析及田间检测的快速筛选，作为仪器分析的辅助方法发挥了一定的作用。免疫分析法作为农药残留快速筛选检测方法受到重视。 更多相关资讯/技术资料，请参考国家标准物质网www.rmhot.com.