Question

western 曝光出来后膜上的条带全部出来了 有哪些原因呀 ？

印出来的结果和膜用丽春红去染差不多~~ 非特异性条带也太多了，一抗是多抗，室温孵育两个钟~

Answer 1

可能原因比较多吧。
比如你封闭的不是很好，可以多封闭一会；或者抗体特异性不高，一抗二抗时你可以加一下BSA，或者降低一抗抗体浓度，或者4度过夜；还有就是可能你一抗二抗后用PBST洗得不是很干净。

Answer 2

1、封闭没有封闭好
2、一抗浓度太高
3、一抗孵育后洗膜不充分

Answer 3

应该是非特异性或交叉反应，你不加一抗，只加二抗试试，是否为二抗非特异性。再做做内参看看，如果内参没问题，那就是你一抗的非特异性或交叉反应。也有可能是封闭原因，换换封闭液试试。

Answer 4

增加一抗稀释比试试

Answer 5

可以的啊 可以啊。