高效液相色谱出峰时间由什么决定的

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健实(北京)分析仪器有限公司_ 2023-06-13
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色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动,称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合…
刺任芹O
2022-11-16 · TA获得超过6.2万个赞
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高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:

1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。

2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。

3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

扩展资料:

高效液相色谱法有“四高一广”的特点:

1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。

2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。

3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。

5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。

6、柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物

7、样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

参考资料来源:百度百科-高效液相色谱

科哲生化
2024-08-26 广告
1,保留时间,色谱峰是关于保留时间的特征峰。在同一条件下,不同保留时间的色谱峰代表不同物质。 2,峰面积,同一物质的浓度和峰面积是成正比的。所以峰面积是计算物质浓度的必要参数。 其他的参数不是必要参数,比如分离度,表示该色谱峰和之前色谱峰是... 点击进入详情页
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