目的基因pcr检测原理是什么?

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武汉华美生物
2023-06-12 · 专注前沿动态,传递有价值的生命科学研究
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武汉华美生物(cusabio)成立于2007年,集科研、生产一体,以科研试剂生产、诊断试剂原料为核心,为高校、研究机构、诊断试剂厂家、生物制药公司提供高质量蛋白、抗体、ELISA试剂盒等产品
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目的基因 PCR 分子生物学检测技术,通过扩增目的基因的特定区域来检测样本中是否存在该基因。其具体原理如下:
PCR(聚合酶链式反应)是体外扩增 DNA 片段的技术,利用特定的引物(primer)和酶,在高温和低温循环条件下使 DNA 片段逐步扩增。
目的基因 PCR 检测首先需要选定目标基因的特异性序列,并设计特异性引物。引物分别配对并结合在目的基因的两端,PCR 扩增需要参考目的基因的序列信息,以确保引物特异性和扩增产品的准确性。
将待检测的样本 DNA 提取出来,加入 PCR 反应体系中,并进行 PCR 扩增。在高温下,DNA 双链解旋,形成单链模板;在低温下,引物与单链模板相互结合,由 Taq 聚合酶在模板上伸长,合成新的 DNA 分子。经过多轮反复扩增,目标序列得以显著富集,可以通过各种检测手段进行分析和鉴定。
根据 PCR 反应产物的大小、数量等参数,利用凝胶电泳、荧光定量PCR、实时 PCR 等方法检测 PCR 扩增产物的存在情况,进而确定样本中是否存在目的基因。
目的基因 PCR 检测技术是一种简单而又快捷的检测手段,广泛应用于生物学、环境科学等领域。通过合理的引物设计和 PCR 反应优化,可以提高检测的特异性和灵敏度,为后续的分子分析和研究提供重要的数据支持。
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