GelRed 是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭（EB），并且远高于EB的灵敏度，同时不需要脱色。由于GelRed和EB有相同的光谱特性，因此用它替代EB时不需要更换成像系统。GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高，并能排除染料对DNA迁移的干扰 。使用 GelRed进行电泳后染色，操作简单，不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在 0.1M NaCl 中，并将凝胶置于染色液中， 30 分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定，可以多次反复使用。相比而言，预制凝胶由于不需要额外染色过程，因此染料用量更少，更为简单经济。
GelRed核酸染料的特点：
Gelred其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
重要提示：
1、无 毒 性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远小于EB。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
2、灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3、稳定性高： 可以使用微波炉加热，可以在室温下保存。
4、信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
5、操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6、适用范围广：适用于预制凝胶（胶染法）和凝胶电泳后染色（泡染法）。
7、与标准凝胶成像系统完美兼容 ：使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时， GelRed 可以完美的替代 EB。
中科雷鸣
2024-11-08 广告
CelRed使用方法简介
1．胶染法（用法同EB）（推荐方法）
（1） 制胶时加入CelRed 核酸染料（例如：每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL CelRed 10,000× 储液，
以此比例类推）。
（2） 按照常规方法进行电泳。
注意事项：
u 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
u 由于CelRed具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将CelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。CelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
u 如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
u 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2．泡染法
（1） 按照常规方法进行电泳。
（2） 用H2O将CelRed 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。（例如将15μL CelRed 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3） 将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10％丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项：
u 用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
u 3× CelRed染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。网页链接
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染色方案
我们发现通过后染色实现了最大的灵敏度，这也消除了染料干扰DNA迁移的可能性。虽然预制方案更方便，但一些DNA样本可能会出现迁移，强烈建议凝胶运行时间不超过2小时。建议使用以下方案。 可能需要进行一些比较以确定哪一个更符合您的需求。
1.后染色方案
1.1根据您的标准方案运行凝胶。
1.2通过将10,000X储备试剂稀释到PH 7.5 - 8缓冲液中制备1X Cyber Green™工作溶液（例如，TAE，TBE或TE优选pH8.0）。
注意：在水中制备的染色溶液不如在缓冲液中制备的染色溶液稳定，必须在24小时内使用，以确保最大的染色灵敏度。另外，在pH低于约7.5或高于8.0的缓冲液中制备的染色溶液不太稳定并且显示出降低的染色效力。
1.3将凝胶放入合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的1X染色溶液浸没凝胶。
注意：不要使用玻璃容器，因为它会吸附染色溶液中的大部分染料。
1.4在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟，避光。
注意：染色溶液可以在黑暗中储存（最好是冷藏）一周，最多重复使用2-3次。
1.5使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。
2.预染色方案
2.1使用标准方案制备琼脂糖凝胶溶液。
2.2在浇注凝胶前将10,000X Cyber Green™原液试剂以1：10,000稀释到凝胶溶液中并充分混合。
2.3根据您的标准方案运行凝胶。
2.4使用254 nm透射仪或使用长路径绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。
3.电泳前的DNA染色
3.1在电泳前，用1：10,000稀释的染料（TE，TBE或TAE）孵育DNA至少15分钟。
3.2根据您的标准方案运行凝胶。
3.3使用254 nm透射仪或使用长路绿色滤光片（如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的激光凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。02968064558
