Question

三种限制性核酸内切酶的作用

Answer 1

首先介绍三种限制性内切酶的特点
I 型限制性内切酶，能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没有专一性，是随机的。代表EcoB、EcoK
II 型限制性内切酶，能识别专一的核苷酸顺序，并在该顺序内的固定位置上切割双链。识别顺序是一个回文对称顺序(palindrome)，即有一个中心对称轴，从这个轴朝二个方向“读”都完全相同
III 型限制性内切酶，有专一的识别顺序，但不是对称的回文顺序,在识别顺序旁边几个核苷酸对的固定位置上切割双链。
根据这三种限制性内切酶的特点，在应用中，根据需要以及所要切割序列的特点选择相应的酶就好，比如载体粘性末端的产生，以及重组质粒的构建

Answer 2

I型：随机切开一条单链，距识别序列1kb处随机性切割。作用时需ATP、Mg2+和SAM
II型：识别未甲基化修饰的双链DNA上的特殊靶序列（多数是回文序列），切开识别位点处双链DNA。形成粘性末端（sticky end）或平齐末端（blunt end），与DNA的来源无关。
III型：在完全肯定的位点切割DNA，距识别序列下游24-26bp处，反应需要ATP、 Mg2+和SAM（S-腺苷蛋氨酸）

Answer 3