Question

如何利用OD260:OD280比值鉴定蛋白纯度是否被核酸污染?

Answer 1

当蛋白中掺入了核酸之 后,OD260：OD280比值变化很明显,尤其是纯的蛋白制品中掺入了一点点核酸后,变化最明显.例如：纯的蛋白样品,其OD260：OD280比值为 0.57,而掺入5%的核酸之后,该笔直上升到了1.06.
但是反过来却是不成立的,即：这个比值不能用来指示核酸被蛋白污染的程度.因为核酸在260nm和280nm处的消光系数比蛋白质高 很多,即使有明显的蛋白污染也不会大幅度改变核酸溶液的OD260：OD280比值.例如,纯的核酸的OD260：OD280比值是2.0,当掺入了5% 的蛋白质污染之后,OD260：OD280比值变成1.99,掺入20%的蛋白质污染后,也才变成1.96.这就说明这个比值用来指示核酸被蛋白污染的程 度是非常不灵敏的.
从下面这个表中就可以明显看出来.
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