Question

上海PCR实践操作考什么

Answer 1

主要考你基本的pcr实验操作,比如说试剂的配置。Pcr仪的基本操作程序设置。以及遇到问题如何解决。
1.试剂准备阶段
试剂准备是PCR操作的第一个流程，需要在试剂贮存和准备区的超净工作台或生物安全柜进行，用确保无污染的移液器、枪头及容器等进行举悉分装。所有的PCR体系都应该在-20℃保存，除了ddH2O之外，其余的试剂组份需完全融化之后再加入，以免影响浓度。配制反应体系应在快速进行，以减少非特异性扩增。体系配制完成之后应马上进行PCR反应。
2.样本制备阶段
样本制备是整个PCR反应中最为关键的环节，在接收样正团乎本时一定要确保样本的密封性以及样本编号的唯一性。严格遵守操作规程进行加样操作，操作时候尽量少说话或者不说话。所有操作需要在生物安全柜内进行，操作前后生物安全柜需要进行紫外灯消毒，注意生物安全柜中物品的排放。戴手套并勤于更换，要有「无核酸观念」。
3.核酸扩增
在核酸扩增环节需要选择质量好的Ep管，装入反应体系的EP管上机前混匀、离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。在样本检或派测的同时设立对照（阳性对照、阴性对照、阴性模板、试剂对照）。同时严密检测PCR扩增仪的各项性能指标，其中对PCR扩增仪而言温度控制就意味着质量。