培养基的配制

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1.配料:

配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量。

2.溶解:

淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,边加热边搅拌以防止烧焦。

3.调PH:

用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。

4.过滤:

滤纸或棉花进行过滤。

5.分装:

一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

6.包扎:

分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

7.灭菌:

按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏。

8.贮存:

培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。


扩展资料

培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:

确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分是否被污染,均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。

同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。

将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。

参考资料

培养基-百度百科


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