Question

简述Southern杂交的基本方法。Southern杂交在哪些方面有应用?

Answer 1

【答案】：Southern杂交的原理和基本方法如下：①将DNA标品用限制性内切酶消化，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段；②高盐下通过毛吸作用，将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上，烘干固定；③硝酸纤维素膜与探针一起温育，附着在滤膜上的DNA与³²P标记的探针杂交；④利用放射自显影术确定与探针互补的每一条DNA带的位置，并进一步确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。Southern杂交在研究DNA图谱、遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要应用价值。