酶促反应速度常数Km值的测定
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1、LineweaverBurk方程:1/V=Km+[S]/Vmax[S]改写成1/V=Km/Vmax[S]+1/Vmax。实验时选择不同的[S]测定相应的v,求出两者的倒数,以1/v对1/[S]绘出工作曲线,然后利用斜率,换算出Km。
2、Hanes作图法:[S]/V=1/Vmax[S]+Km/Vmax。用[S]/V对[S]作图,所得直线的斜率为1/Vmax,[S]/V轴上的截距为Km/Vmax,而[S]轴上的截距为-Km。
扩展资料
米氏常数的意义:
1、米氏常数是酶的特征常数之一,每一种酶都有它的Km值,Km值只与酶的结构和所催化的底物有关,与酶浓度无关。
2、判断酶与底物亲和力的大小。Km值小,表示用很低的底物浓度即可达到最大反应速度的一半,说明酶与底物亲和力大。可用1/Km近似地表示亲和力,1/Km愈大,酶与底物的亲和力愈大,酶促反应愈易进行。
参考资料来源:百度百科-米氏常数
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